western blot原理及操作流程

western blot原理及操作流程 经过PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的蛋白质样品转移到固相载体例如硝酸纤维素薄膜上固相载体以非共价键形式吸附蛋白质且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。 以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原与对应的抗体起免疫反应再与酶或同位素标记的第二抗体起反应经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。 该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。